隨著我國(guó)養(yǎng)殖水平與養(yǎng)殖技術(shù)人員素質(zhì)的不斷提高，在疾病診斷方面，越來(lái)越多的動(dòng)保企業(yè)、飼料企業(yè)以及養(yǎng)殖公司(戶(hù))開(kāi)始重視實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)這一診斷工具。很多人對(duì)實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)結(jié)果都具備一定的分析能力，但是，筆者在服務(wù)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)有一些人經(jīng)常會(huì)誤讀檢測(cè)結(jié)果，誤讀的結(jié)果進(jìn)一步誤導(dǎo)養(yǎng)殖者做出錯(cuò)誤的決定。其中，針對(duì)偽狂犬病毒(PRV)抗體的解讀就存在幾個(gè)典型的誤區(qū)。

　　在解釋這幾個(gè)誤區(qū)前，筆者簡(jiǎn)單介紹下偽狂犬病毒常見(jiàn)的三種抗體：抗糖蛋白gB抗體、抗糖蛋白gE抗體以及中和抗體。

　　PRV不同毒株的毒力千差萬(wàn)別。毒力不同致使疾病的嚴(yán)重程度、帶毒時(shí)間長(zhǎng)短、帶毒量以及組織嗜性不同。PRV受多基因的控制，這些基因單個(gè)或多個(gè)缺失可使PRV毒力減弱。與毒力相關(guān)的病毒蛋白包括病毒囊膜糖蛋白、病毒編碼的酶以及非必需的衣殼相關(guān)蛋白。根據(jù)糖蛋白在細(xì)胞培養(yǎng)液病毒復(fù)制中的不同作用，將其分為非必需糖蛋白(gC、gE、gG、gI、gM以及gN)和必需糖蛋白(gB、gD、gH、gK以及gL)。在病毒毒力方面，糖蛋白主要是介導(dǎo)PRV黏附至靶細(xì)胞。表1列出了一些糖蛋白的功能。

　　表1 PRV糖蛋白的特性

　　注：“+”表示有重要功能，“[+]”表示有非必需功能或調(diào)節(jié)功能。

　　由病毒的糖蛋白gB和gE刺激機(jī)體的免疫系統(tǒng)產(chǎn)生相應(yīng)的抗體，抗體分別為抗gB抗體與抗gE抗體(以下分別簡(jiǎn)稱(chēng)為“gB抗體”、“gE抗體”)。

　　在PRV入侵三叉神經(jīng)和嗅神經(jīng)通路上，糖蛋白gE是一個(gè)關(guān)鍵性的蛋白質(zhì)。PRV gE基因的缺失可以顯著降低病毒的毒力，使得神經(jīng)元細(xì)胞感染受到限制，所以活疫苗一般都是缺失gE基因。既然PRV缺失gE基因，那么由此活疫苗復(fù)制出來(lái)的疫苗毒株不含糖蛋白gE，進(jìn)而在體內(nèi)無(wú)法刺激機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的gE抗體。

　　凡能與病毒結(jié)合，使其失去感染力的抗體稱(chēng)為中和抗體。病毒可以刺激機(jī)體產(chǎn)生中和抗體，而中和抗體又與病毒結(jié)合后使病毒失去吸附細(xì)胞的能力，從而喪失感染力;病毒與其特異性的中和抗體相遇之后發(fā)生的作用，類(lèi)似于化學(xué)中的相應(yīng)酸堿相遇之后發(fā)生的中和反應(yīng)，所以稱(chēng)這種作用為中和作用。而根據(jù)抗體能否中和病毒的感染性而建立的免疫學(xué)試驗(yàn)稱(chēng)為中和試驗(yàn)。

　　知道了gB抗體、gE抗體以及中和抗體是什么之后，筆者向讀者提出以下幾個(gè)問(wèn)題：

　　1、豬體內(nèi)的gB抗體一定代表的是疫苗免疫產(chǎn)生的抗體嗎?

　　這個(gè)問(wèn)題的答案是：不一定。或者筆者換個(gè)問(wèn)法：既然疫苗毒株感染豬可以產(chǎn)生gB抗體，那么野毒毒株感染豬是不是也可以產(chǎn)生gB抗體?答案是肯定的。

　　因?yàn)槿绫?所示囊膜糖蛋白gB是PRV復(fù)制必需的糖蛋白，所以作為活疫苗或者野毒株都存在囊膜糖蛋白gB，因此不管是活疫苗免疫接種還是野毒感染都會(huì)刺激機(jī)體產(chǎn)生gB抗體。當(dāng)豬群是偽狂犬野毒陽(yáng)性時(shí)，其體內(nèi)的gB抗體很可能是由疫苗免疫產(chǎn)生的gB抗體和野毒感染產(chǎn)生的gB抗體共同組成。只有在排除野毒感染的情況下，gB抗體才代表的是疫苗免疫產(chǎn)生的抗體。

　　此時(shí)，請(qǐng)讀者問(wèn)下自己是否曾經(jīng)浪費(fèi)錢(qián)對(duì)偽狂犬野毒陽(yáng)性豬群檢測(cè)過(guò)gB抗體呢?如果非要檢測(cè)，那請(qǐng)先確定豬群或豬只無(wú)偽狂野毒感染，也即先確定樣品的gE抗體檢測(cè)結(jié)果為陰性時(shí)，才檢測(cè)gB抗體。

　　2、豬體內(nèi)存在gE抗體是否就表示該豬存在野毒感染?

　　很多人在解讀檢測(cè)結(jié)果時(shí)，只要看到gE抗體，就把其看成偽狂犬野毒感染，其實(shí)這種判讀是片面的。當(dāng)然gE抗體一定是野毒感染產(chǎn)生的抗體(免疫的疫苗是gE基因缺失疫苗)，這一點(diǎn)沒(méi)錯(cuò)。但是我們往往會(huì)忽略一種情況：當(dāng)母豬感染野毒后產(chǎn)生的gE抗體同樣可以通過(guò)母乳傳遞給哺乳仔豬，而且母源gE抗體比較強(qiáng)，經(jīng)?？梢匝永m(xù)到10～14周齡左右。經(jīng)常會(huì)有人拿到檢測(cè)報(bào)告來(lái)問(wèn)筆者，怎么產(chǎn)房仔豬、保育豬野毒感染這么嚴(yán)重?

　　同樣，請(qǐng)問(wèn)讀者當(dāng)明明知道豬場(chǎng)是偽狂犬野毒陽(yáng)性場(chǎng)時(shí)，是否還在浪費(fèi)錢(qián)檢測(cè)產(chǎn)房仔豬或者保育前期仔豬的gE抗體呢?一般來(lái)說(shuō)，此時(shí)檢測(cè)商品豬gE抗體的主要目的是看gE抗體在商品豬的轉(zhuǎn)陽(yáng)時(shí)間或者育肥豬是否轉(zhuǎn)為陰性。因此，筆者建議一般采取10周齡之后豬群的血樣進(jìn)行檢測(cè)，如10周齡、14周齡、18周齡、22周齡、26周齡商品豬的血樣。

　　3、豬體內(nèi)的gB抗體水平高低能否完全代表疫苗的保護(hù)效果好壞?在體液免疫方面，豬只的免疫保護(hù)靠什么抗體?

　　PRV的一系列糖蛋白、非糖蛋白和結(jié)構(gòu)蛋白的抗體都可以抑制病毒在體內(nèi)或體外的復(fù)制，但是它們起到的作用程度不一。

　　《豬病學(xué)》第九版中的研究表明針對(duì)gC和gD的補(bǔ)體依賴(lài)性病毒中和抗體是最有效的。因?yàn)?，gC抗體具有抑制病毒在靶細(xì)胞上黏附的作用，而gD抗體具有抑制病毒穿入的作用，從而阻斷了感染的第一階段;在恢復(fù)期，抑制病毒復(fù)制的主要抗體是針對(duì)gC的抗體。gB抗體也可以促進(jìn)豬的免疫保護(hù)作用。

　　另外，2013年4～6月，浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所在研究不同品牌疫苗誘導(dǎo)流行毒株中和抗體能力的同時(shí)，研究了gB抗體與流行毒中和抗體的關(guān)系。其中就存在誘導(dǎo)gB抗體最好的試驗(yàn)組誘導(dǎo)的中和抗體很不好的現(xiàn)象。這似乎說(shuō)明gB抗體和目前流行毒株的中和抗體相關(guān)性不強(qiáng)。

　　而正如前文提到的中和抗體是能夠與病毒結(jié)合，使其失去感染力的抗體。這是最直接的抑制病毒復(fù)制的重要途徑。當(dāng)然中和抗體不是依靠某個(gè)抗體決定的，它是由多個(gè)抗體共同作用的結(jié)果(如上文提到的gC抗體和gD抗體等)。衡量中和抗體水平高低的一個(gè)方法即是中和試驗(yàn)，通過(guò)中和試驗(yàn)可以測(cè)出血清中和病毒的中和效價(jià)，效價(jià)越高說(shuō)明中和病毒的能力越強(qiáng)。

　　4、只要是進(jìn)口PRV疫苗，效果都差不多?

　　疫苗效果的好與壞，不是靠感覺(jué)而是靠評(píng)估方法來(lái)客觀評(píng)估的，其中常用的一個(gè)評(píng)估疫苗產(chǎn)生中和抗體效價(jià)的方法是中和試驗(yàn)，通過(guò)中和試驗(yàn)就可以客觀地評(píng)價(jià)疫苗產(chǎn)生的抗體中和病毒的能力。廣東源豐農(nóng)業(yè)有限公司(國(guó)家生豬核心育種場(chǎng)，偽狂犬病毒陰性場(chǎng))為了客觀評(píng)估不同進(jìn)口疫苗產(chǎn)生的抗體對(duì)流行毒株的中和能力而進(jìn)行了中和試驗(yàn)。具體試驗(yàn)如下：

　　2014年，廣東源豐農(nóng)業(yè)有限公司選擇了4種著名的、不同品牌的進(jìn)口PRV疫苗，分別做了母豬試驗(yàn)和生長(zhǎng)豬試驗(yàn)。該場(chǎng)共約有5000頭基礎(chǔ)母豬，分多條生產(chǎn)線飼養(yǎng)。

　　母豬試驗(yàn)：一條線免疫P苗、一條線免疫F苗、其余免疫M(jìn)苗(M、F為Bartha-K61毒株，P為Bucharest株)。分組免疫后6個(gè)月，從三組分別隨機(jī)抽取10頭、10頭、14頭母豬的血清用PRV流行毒株(HuBei株)做中和試驗(yàn)，結(jié)果見(jiàn)表2。為了更直觀地表示抗體水平的高低，本試驗(yàn)用能夠中和病毒的最高血清稀釋倍數(shù)來(lái)表示樣品的中和抗體水平，例如，血清抗體值為“8”，則表示該血清的中和抗體效價(jià)為1︰8。

　　表2 M、P、F苗試驗(yàn)組母豬免疫疫苗6個(gè)月后的中和試驗(yàn)結(jié)果

　　生長(zhǎng)豬試驗(yàn)：試驗(yàn)分為4組，每組10頭豬，分別免疫M(jìn)、P、B、F等不同品牌的PRV疫苗(M、P、F同母豬試驗(yàn)疫苗，B為另一個(gè)Bartha-K61毒株進(jìn)口疫苗);免疫程序?yàn)?1周齡和15周齡兩次免疫，15周齡免疫后收集血清用PRV流行毒株(HuBei株)做血清中和試驗(yàn)，結(jié)果見(jiàn)表3。

　　表3 各試驗(yàn)組生長(zhǎng)豬免疫2次疫苗后5周的中和試驗(yàn)結(jié)果

　　由表2、表3可知，無(wú)論是在母豬試驗(yàn)還是在生長(zhǎng)豬試驗(yàn)中，不同品牌的PRV疫苗(M、B、F疫苗同為Bartha-K61毒株)免疫誘導(dǎo)豬只產(chǎn)生的流行毒中和抗體水平差異顯著。

　　總之，首先要知道gB抗體、gE抗體以及中和抗體是怎么來(lái)的;其次，我們也要清楚只有在排除偽狂野毒感染的情況下檢測(cè)gB抗體才具有指示疫苗抗體產(chǎn)生的意義;再次，我們要知道哺乳仔豬也可以從母豬獲得母源gE抗體，并可延續(xù)至保育階段;第四，評(píng)估疫苗的體液免疫效果就看針對(duì)當(dāng)前流行毒株中和抗體的效價(jià)，單憑gB抗體水平高低來(lái)評(píng)估疫苗效果好壞太片面;最后，雖然是同一個(gè)毒株的PRV進(jìn)口疫苗，但是不同品牌疫苗的中和效價(jià)差距很顯著。

　　認(rèn)清這四個(gè)誤區(qū)不僅能幫助讀者準(zhǔn)確地解讀檢測(cè)結(jié)果，從而做出正確的決定，而且還能幫助讀者正確判斷哪些檢測(cè)是有意義的，從而不再花冤枉錢(qián)做沒(méi)有必要的檢測(cè)。