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為何有些抗體做WB檢測到的條帶與理論大小相比有區(qū)別?

發(fā)布時間:2018-01-05 10:30:05來源:科捷生物

  為何有些抗體做WB檢測到的條帶與理論大小相比有區(qū)別?

  導致這一結(jié)果的主要原因有:

  1.天然蛋白存在某些修飾情況,如磷酸化、糖基化等,這些修飾都會導致蛋白質(zhì)的分子量增加。

  2.有些蛋白存在不同的isform,每個isform得到的蛋白大小都有所差別。

  3.氨基酸組成,不同氨基酸所帶電荷不一樣,導致相對電荷不同,遷移率有所差異,通過SDS-PAGE電泳檢測的大小會有所偏差。

  4.多聚體(二聚、三聚等),多聚體形式的蛋白常常會抵制WB所做的還原條件,還原不完全等會導致檢測條帶偏大。

  5.翻譯后的剪切,有些蛋白以前體的形式合成或者帶有信號肽,翻譯后剪切掉前肽或者信號肽,導致檢測條帶變小。

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